你知道你培養(yǎng)的細胞還是不是原來的細胞?
要說一個實驗汪怕什么,細胞養(yǎng)死了是*
但是,還有一種情況更絕望,那就是——細胞還好好的,但是這個細胞它已經不是它!
所以,你新買到的細胞、實驗室傳了幾代的細胞、又或者儲存于超低溫冰箱幾年不用的細胞,它真的還是原來的那個細胞嗎?
其實細胞系認證的問題已經存在了幾十年,2017年,有機構研究抽查了中國28個研究機構中保存的278個細胞系,并對細胞進行鑒定。
調查結果顯示,有128個細胞系是錯誤鑒定的,錯誤率高達46%。
因使用了交叉污染或錯誤辨識的細胞而導致研究結論錯誤、結果不可重復、臨床細胞**災難性后果……這浪費大量時間、精力和金錢。
細胞系被錯誤識別,往小了說會浪費時間和金錢,導致結果不可重復性,文獻被退回;
往大了講還可能對人類健康產生潛在的威脅,、疫苗和其它生物都是以實驗室的研究發(fā)現為基礎而產生的,往往都是跟細胞培養(yǎng)相關。
細胞是一種很特殊的商品,由于其具有可復制性,因此很容易被自行復制后進行出售傳播,而這些自行傳代復制的細胞幾乎*,所以很容易引起大家購買。
但是這些細胞傳代的次數、培養(yǎng)的條件以及是否有污染等都無法得到保障,等你實驗焦頭爛額毫無進展卻突然發(fā)現是細胞被污染了,那滋味真的是不好受的!
有沒有想過細胞STR鑒定?!
細胞STR鑒定是什么?——給你的細胞一個“明明白白的”身份!
STR,全稱Shorttandemrepeat,中文名“短串聯重復序列”,是一類廣泛存在于真核生物基因組中的DNA串聯重復序列,其核心序列2~7bp,重復次數通常為10~30次。由于核心序列重復次數的個體間差異,多數STR基因具有多態(tài)性。
不同個體來源的細胞在不同STR位點具有特異性的重復次數,因而使得不同細胞具有其特征性的圖譜,根據圖譜的數據可以判定細胞是否為單一細胞。
近年來由于其檢測手段和技術方法的改進已經廣泛應用于遺傳制圖、基因定位、法醫(yī)學鑒定、人類學以及遺傳病的診斷等許多領域的研究,是目前應用比較廣泛的遺傳標記。
細胞STR鑒定的特點
STR圖譜鑒別通過標準化的操作,采用自動化的DNA分析儀對PCR產物進行**的分析,并以簡單的數字描述STR序列重復次數,不僅增加了結果的客觀性,而且所需細胞數量少(低至1×103個細胞,
而細胞檢定中常規(guī)采用的同工酶法通常需要5×106個細胞),結果穩(wěn)定,特異性強??偟膩碚f,其分型快速、經濟、易于自動化,可重復性好,且數據格式適合建立一個標準參考數據庫的特點,使得STR的應用價值*大。
細胞STR鑒定的案例
已被描述的經典案例是Hela細胞污染(關于Hela細胞污染有好幾個案例),令人驚奇的是,許多被Hela細胞污染的細胞系居然在一些備受尊敬的雜志上仍被使用,而這一使用距離它們*先發(fā)現為Hela細胞的時間長達40年之久。
T24是另外一種生長快速的細胞系,它常常污染許多經推測來源于不同膀胱癌的細胞系。EVC304*先被認為是自發(fā)轉化的人類正常內皮細胞系,但后來卻發(fā)現它是T24膀胱癌細胞系。令人感到意外的是,EVC304不是內皮細胞的這一論述對它作為內皮細胞模型的公開發(fā)表幾乎沒多大影響。
細胞STR鑒別刻不容緩
有許多緣由可以引起細胞培養(yǎng)物錯誤鑒定,每一個實驗室都存在風險。
造成這種問題出現的原因有:實驗員的工作負荷,缺乏注意,在細胞操作過程中的分心,試劑的共用,耗材共用,在沒有充分分離每一細胞類型情況下同時對多個培養(yǎng)物進行操作等。
當交叉污染發(fā)生時,一種細胞類型迅速生長而超過另一種,在4-5次細胞傳代后,一個純的污染細胞培養(yǎng)物將會形成。
異種移植也會導致細胞系交叉污染和錯誤鑒定,來自異種移植的復蘇細胞會被宿主動物細胞所替代。因此,由于這些缺乏重視及未采取質控措施導致的細胞錯誤鑒定現象開始普遍。
但簡單、經濟的質控措施即可以阻止或至少會減少細胞錯誤鑒定的發(fā)生,這也被認為是生物制藥領域出現相對較低細胞錯誤鑒定報道的有效手段。
細胞系遭污染,也許很容易發(fā)生,但發(fā)生了對科學研究影響有多大?Nature社論文章稱,這要取決于實驗項目的類型。
比如說,細胞系被用作生化藥劑來源,混入其中的另外一種細胞則是無害的。但是,如果用這個細胞系來研究某一組織的特性則可能出現重大的失誤。因此,細胞鑒別格外重要。
沒有一個單一的方法可提供所有的信息來鑒定一個細胞系。
STR分型是這一時期的*佳代表。隨著新信息的可用,STR分型標準將會不斷地改進,不僅保證科研用細胞的正確性,還要作為生產用細胞的質控方法,用于過程監(jiān)測。
素爾生物——細胞系培養(yǎng)&STR鑒定服務雙重服務
素爾生物細胞引進于ATCC/中科院/協和醫(yī)院,已篩選出數百種狀態(tài)良好的細胞系,構建了自家細胞庫。本著嚴謹負責的態(tài)度,對細胞庫中幾乎所有的人源細胞系、大鼠細胞系、小鼠細胞系進行了STR鑒定,為您的科研工作提供安全保障。
不再擔心細胞黑身份,明明白白做實驗的方法,你get到了沒?