ATCC細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物,也就是說,
ATCC細胞株是用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。
ATCC細胞株是用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。原代培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后即為細胞系,由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代,或傳代次數(shù)有限, 可稱為有限細胞系,如可以連續(xù)培養(yǎng), 則稱為連續(xù)細胞系,培養(yǎng)50代以上并無限培養(yǎng)下去。 所以細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的培養(yǎng)細胞。從培養(yǎng)代數(shù)來講,可培養(yǎng)到40-50代。細胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。對于人類腫瘤細胞,在體外培養(yǎng)半年以上,生長穩(wěn)定,并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。
購買ATCC細胞株需要考慮哪些因素?
1、細胞株的生物等級,由于有些細胞株及菌株屬于管制品,所以從國外購貨比較麻煩。
2、在購買國外細胞株時,需交待國外加比較多的干冰(一般在13公斤以上,采用比較密封的泡沫盒加套紙箱。
3、報關(guān)時盡量提供比較充足的證明材料,以免擔(dān)擱時間而導(dǎo)致干冰揮發(fā)完細胞株死亡,甚至于被退回給發(fā)貨人。
4、如果通過國外細胞株在國內(nèi)的代理商購買的話,合同中需注明以下一些內(nèi)容:
a. 明確的到貨時間,這個時間需注明的是工作日,還是普通日。
b. 采用什么樣的運輸方法?
c. 如果屬于技術(shù)外的因素而細胞株無法培養(yǎng)活,供方需負什么樣的責(zé)任?
d. 細胞株的詳細資料,以及細胞株的代數(shù),其中,ATCC的細胞株一般都在幾十代,這個需要與國外確認,IST-Banca可與他們的代理商索取詳細資料!
e. 需在合同中注明*,避免相關(guān)公司魚龍渾雜,從國外購買回一株細胞株,經(jīng)過培養(yǎng)傳代后,同時供應(yīng)給幾個人;一般國外進口的細胞株都會有原裝的凍存管,而且每一支凍存管上都會有批號,而且每次的批號都不一樣。
f. 在決定購買細胞株之前,必須仔細閱讀他們的培養(yǎng)信息,所謂“細胞株未到,培養(yǎng)基先行一步”。
g. 在接到細胞株后,要求供應(yīng)公司的人員現(xiàn)場參與,從而用于確認責(zé)任。
h. 在培養(yǎng)前,請確認您的二氧化碳培養(yǎng)箱二氧化碳濃度的準(zhǔn)確性,國外的細胞株建議用進口的細胞培養(yǎng)瓶,比如:orange,corning, falcon品牌的培養(yǎng)瓶。
i. 詢問你的代理商或者經(jīng)銷商,接到細胞株后是否需要離心置換出DMSO,因為有些細胞廠家建議不要離心,他們會認為離心而導(dǎo)致的碎片比DMSO產(chǎn)生毒性的害處更大,如果可以離心,轉(zhuǎn)速不要過高,一般都在1000轉(zhuǎn)以下,此處需要注意,因為有的公司會拿這一點來拒絕索賠!
j. 培養(yǎng)基的服務(wù),仔細與供應(yīng)商確認培養(yǎng)基的品牌及份量,以免供應(yīng)商以些理由來推翻你索賠的理由。
k. 在細胞株復(fù)蘇時,一定要先想好步驟再做,一步一步來做,避免導(dǎo)致操作中的污染,復(fù)蘇是一個非常重要的步驟,往往容易導(dǎo)致污染,然后為污染所導(dǎo)致的雜質(zhì)而傷透腦筋。